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摘要: 重組克隆DNA用KpnI/BamHI雙酶切得到馬鈴薯Y病毒NIb基因，將其插入質(zhì)粒pRok2相應(yīng)切點(diǎn)中構(gòu)成植物表達(dá)載體,。用重組質(zhì)粒pRok2轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌(Agrobacterium tumefaciens)LBA4404菌株,，葉盤法將基因NIb轉(zhuǎn)入烤煙品種NC89的染色體，獲得抗卡那霉素的轉(zhuǎn)化再生植株,。經(jīng)抗性篩選,、PCR檢測(cè)、無性擴(kuò)繁和大量重復(fù)抗病鑒定,，結(jié)果表明,，轉(zhuǎn)化煙草植株DNA中整合了外源目的基因，且表現(xiàn)抵抗20μg/mlPVYN的侵染,，ELISA分析認(rèn)為抗性植株無病毒累積,，初步篩選出對(duì)PVYN侵染具有較高抗性的轉(zhuǎn)基因煙草植株。